اترك رسالة
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
من فضلك تفقد بريدك الالكتروني!
مزيد من المعلومات يسهل التواصل بشكل أفضل.
تم الإرسال بنجاح!
اترك رسالة
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
من فضلك تفقد بريدك الالكتروني!
بحجم: | 16.7 * 11.5 * 10.2 سم | مدة الصلاحية: | 18 شهرا |
---|---|---|---|
الكلمات الدالة: | مجموعة اختبار Nitrofuran AOZ ELISA | تخصيص: | 96 ويلز / كيت |
خدمة ما بعد البيع: | الدعم الفني عبر الإنترنت | يكتب: | طقم اختبار سريع لسلامة الغذاء |
الحساسية (جزء في البليون): | 0.01 جزء في البليون | فترة حضانة: | 30 دقيقة - 15 دقيقة |
إبراز: | عدة اختبار إليزا 96 ويلز / كيت,عدة اختبار إليسا ISO13485,15 دقيقة مجموعة اختبار الروبيان |
مجموعة اختبار Nitrofuran AOZ ELISA لحساسية عسل الروبيان والأسماك 0.01ppb 96 Wells / Kit
1. المبدأ
هذا وطقم الاختبار السريع لسلامة الأغذيةيعتمد على المقايسة المناعية للإنزيم التنافسي للكشف عن AOZ في العينة.يتم طلاء مستضدات التوصيل مسبقًا على خطوط البئر الصغيرة.تتنافس AOZ في العينة ومستضدات الاقتران المطلية مسبقًا على خطوط الآبار الدقيقة على الأجسام المضادة لـ AOZ.بعد إضافة الإنزيم المتقارن ، تتم إضافة ركيزة TMB للتلوين.قيمة الكثافة البصرية (OD) للعينة لها ارتباط سلبي مع AOZ فيها.تتم مقارنة هذه القيمة بالمنحنى القياسي ويتم الحصول على تركيز AOZ لاحقًا.
2. المكونات
1 | شرائط المايكرو ويل |
12 شرائط قابلة للإزالة 8 كل الآبار |
|
2 | 6 × محلول قياسي (1 مل لكل منهما) | 0ppb | 0.01 جزء في البليون |
0.03ppb | 0.09ppb | ||
0.27ppb | 0.81ppb | ||
3 | انزيم متقارن | 7 مل | قبعة حمراء |
4 | حل عمل الجسم المضاد | 7 مل | كاب أزرق |
5 | الركيزة أ | 7 مل | قبعة بيضاء |
6 | الركيزة ب | 7 مل | غطاء أسود |
7 | وقف الحل | 7 مل | غطاء أصفر |
8 | 20 × عازلة غسيل مركزة | 40 مل | قبعة بيضاء |
9 | 2 × محلول إعادة تذويب مركز | 50 مل | غطاء شفاف |
10 | 2-نيتروبنزلدهيد (C7H5NO3) | 10 مل | غطاء أسود |
3. المواصفات الفنية
الحساسية: 0.01 جزء في البليون
درجة حرارة التفريخ: 25 درجة مئوية
وقت الحضانة: 30 دقيقة ~ 15 دقيقة
حد الكشف
الأنسجة والبيض والعسل: 0.05 جزء في المليون
معدل التفاعل المتبادل
AOZ 100٪
AMOZ <0.1٪
AHD <0.1٪
SEM <0.1٪
معدل الاسترداد
نسيج بيض 95 ± 25٪
عسل 85 ± 23٪
4. المواد المطلوبة ولكن لم يتم توفيرها
1) المعدات: قارئ الصفيحة الدقيقة ، الطابعة ، المجانس ، جهاز تجفيف النيتروجين ، الدوامة ، الطرد المركزي ، ماصات القياس ، التوازن (حساسية متبادلة 0.01 جم) ، حاضنة ، حمام مائي ؛
2) Micropipettors: أحادية القناة 20-200 ميكرولتر ، 100-1000 ميكرولتر ، ومتعددة القنوات 30 300 ميكرولتر ؛
3) الكواشف: هيدروكسيد الصوديوم ، أسيتات الإيثيل ، n-Hexane ، HCI (36.5٪ تقريبًا) ، K2HPO4 · 3H2O
5. عينة ما قبل المعالجة
تعليمات
يجب التعامل مع النقاط التالية قبل المعالجة المسبقة لأي نوع من العينات:
1) يمكن استخدام النصائح التي يمكن التخلص منها فقط للتجارب ويجب تغيير النصائح عند استخدامها لامتصاص الكواشف المختلفة ؛
2) قبل التجربة ، يجب أن تكون كل المعدات التجريبية نظيفة ويجب إعادة تنظيفها إذا لزم الأمر ، وذلك لتجنب التلوث الذي يتعارض مع نتائج التجربة.
تحضير المحلول قبل المعالجة المسبقة للعينة:
1) 0.1 م K2HPO4: حل 11.4 جم K2HPO4 · 3H2O في الماء منزوع الأيونات إلى 500 مل.
2) 1 M حمض الهيدروكلوريك: حل 8.6 مل HCI (حوالي 36.5٪) في الماء منزوع الأيونات إلى 100 مل.
3) 1 م هيدروكسيد الصوديوم: حل 4 جم هيدروكسيد الصوديوم في الماء منزوع الأيونات إلى 100 مل.
4) يتم تخفيف محلول إعادة الإذابة المركز 2 × بالماء منزوع الأيونات عند 1: 1 (1 مل من محلول إعادة الإذابة المركز + 1 مل من الماء منزوع الأيونات) ، ويستخدم في إعادة إذابة العينة.
5.1 تحضير العينات
أ)الأنسجة والبيض
1) قم بوزن 1 ± 0.05 جم من العينة المتجانسة ، أضف 4 مل من الماء المقطر ، 0.5 مل 1 م هيدروكلوريد و 100 ميكروليتر 2-نيتروبنزالديهيد (C7H5NO3) لكل أنبوب ، رج بشكل صحيح لمدة 2 دقيقة ؛.
2) احتضان في 37 ℃ خلال الليل (حوالي 16 ساعة) أو الحضانة في 56 ℃ بواسطة حمام مائي (2 ساعة).
3) أضف 5 مل 0.1 م K2HPO4 ، 0.4 مل 1 م هيدروكسيد الصوديوم و 6 مل إيثيل أسيتات لكل أنبوب ، رج لمدة 30 ثانية.
4) جهاز طرد مركزي فوق 4000 لفة / دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق (إذا كان هناك مستحلب أو طبقة أسيتات الإيثيل لا تكفي لـ 3 مل ، احتضان العينة في حمام مائي 80 درجة مئوية لمدة 10 دقائق وجهاز الطرد المركزي بشكل متكرر ؛ أو زيادة السرعة وتمديد وقت أجهزة الطرد المركزي).
5) انقل 3 مل من طبقة أسيتات الإيثيل إلى أنبوب طرد مركزي جديد وتبخر حتى يجف بالنيتروجين أو الهواء عند 50 درجة مئوية.
6) قم بإذابة المخلفات الجافة في 2 مل N-hexane ، أضف 1 مل من محلول إعادة الإذابة المخفف ، واخلطه بشكل صحيح لمدة 30 ثانية ، وأجهزة الطرد المركزي فوق 4000 دورة / دقيقة عند درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) لمدة 10 دقائق ؛قم بإزالة طور N-hexane العلوي (إذا كان هناك استحلاب ، بعد إزالة طور N-hexane العلوي ، احتضان العينة في حمام مائي 70 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة ، جهاز الطرد المركزي بشكل متكرر).
7) خذ 50 ميكرولتر من الأقل لتحليلها.
طية تخفيف العينة: 2
ب) العسل
1) قم بوزن 2 ± 0.05 جم من العينة المتجانسة (عسل) ، أضف 4 مل من الماء المقطر ، 0.5 مل 1 م هيدروكلوريد و 100 ميكرولتر 2-نيتروبنزالديهيد (C7H5NO3) لكل أنبوب ، رج جيدًا لمدة دقيقتين ؛.
2) احتضان في 37 ℃ خلال الليل (حوالي 16 ساعة) أو الحضانة في 56 ℃ بواسطة حمام مائي (2 ساعة).
3) أضف 5 مل 0.1 م K2HPO4 ، 0.4 مل 1 م هيدروكسيد الصوديوم و 6 مل إيثيل أسيتات لكل أنبوب ، رج لمدة 30 ثانية.
4) جهاز طرد مركزي فوق 4000 لفة / دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق (إذا كان هناك مستحلب أو طبقة أسيتات الإيثيل لا تكفي لـ 3 مل ، احتضان العينة في حمام مائي 80 درجة مئوية لمدة 10 دقائق وجهاز الطرد المركزي بشكل متكرر ؛ أو زيادة السرعة وتمديد وقت أجهزة الطرد المركزي).
5) انقل 3 مل من طبقة أسيتات الإيثيل إلى أنبوب طرد مركزي جديد وتبخر حتى يجف بالنيتروجين أو الهواء عند 50 درجة مئوية.
6) قم بإذابة المخلفات الجافة في 2 مل N-hexane ، أضف 1 مل من محلول إعادة الإذابة المخفف ، واخلط بشكل صحيح لمدة 30 ثانية ، وأجهزة الطرد المركزي فوق 4000r / min عند درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) لمدة 10 دقائق ؛قم بإزالة طور N-hexane العلوي (إذا كان هناك استحلاب ، بعد إزالة طور N-hexane العلوي ، احتضان العينة في حمام مائي 70 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة ، جهاز الطرد المركزي بشكل متكرر).
7) خذ 50 ميكرولتر من الأقل لتحليلها.
طية تخفيف العينة: 1
6. إجراءات ELISA
6.1 تعليمات
1) أحضر جميع الكواشف وشرائط الآبار الدقيقة إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) قبل الاستخدام ؛
2) أعد جميع الكواشف إلى 2-8 ℃ مباشرة بعد الاستخدام ؛
3) تعتمد قابلية استنساخ تحليل ELISA ، إلى حد كبير ، على اتساق غسل اللوحة.العملية الصحيحة لغسيل الألواح هي النقطة الأساسية في إجراءات ELISA ؛
4) بالنسبة للحضانة في درجات حرارة ثابتة ، يجب أن تتجنب جميع العينات والكواشف التعرض للضوء ، ويجب أن يتم إغلاق كل صفيحة ميكروية بواسطة غشاء الغطاء.
6.2 خطوات تطبيق العملية
1)قم بإحضار مجموعة الاختبار إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 30 دقيقة على الأقل ، لاحظ أنه يجب رج كل كاشف لخلطه بالتساوي قبل الاستخدام ، ضع شرائح البئر الدقيقة المطلوبة في إطارات الألواح.أعد ختم الصفيحة غير المستخدمة ، واحفظها في 2-8 ℃ ، غير مجمدة.
2)تحضير المحلول: خفف 40 مل من المخزن المؤقت للغسيل المركز 20 × بالماء منزوع الأيونات عند 1:19 (جزء واحد 20 × عازلة غسيل مركزة + 19 جزءًا من الماء منزوع الأيونات).أو استعد حسب الحاجة..
3)الترقيم: ترقيم الآبار الدقيقة وفقًا للعينات والحل القياسي ؛يجب تنفيذ كل عينة وحل قياسي في نسختين ، وتسجيل مواقعهم.
4)إضافة 50 ميكرولتر من العينة أو المحلول القياسي في آبار مكررة منفصلة ؛أضف 50 ميكرولتر من الإنزيم المتقارن ثم 50 ميكرولتر من محلول عمل الجسم المضاد في كل بئر ، واخلط بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا.ختم صفيحة ميكروسكوبية مع غشاء الغطاء ، واحتضان في 25 لمدة 30 دقيقة.
5)صب السائل من ميكروويل ، رفرف ليجف على ورق ماص ، أضف 250 ميكرولتر / بئر من عازلة الغسيل لغسل الصفيحة الدقيقة لمدة 15-30 ثانية ، ثم أخرجها ورفرفها لتجف بورق ماص ، كرر 4-5 مرات.(إذا كانت هناك فقاعات بعد الخفقان ، قم بقصها بالنصائح النظيفة).
6)التلوين: أضف 50 ميكرولتر من الركيزة A ثم 50 ميكرولتر من الركيزة B في كل بئر.امزج بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا ، ثم احتضانها عند 25 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة في الظلام للتلوين.
7)التحديد: أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف في كل بئر.امزج بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا.اضبط الطول الموجي لقارئ الصفيحة الدقيقة على 450 نانومتر لتحديد قيمة OD لكل بئر.(نوصي بقراءة قيمة OD عند الطول الموجي المزدوج 450/630 نانومتر في غضون 5 دقائق).
7. نتيجة الحكم
هناك طريقتان للحكم على النتائج: الطريقة الأولى هي الحكم الخام ، والثانية هي التحديد الكمي.لاحظ أن قيمة OD للعينة لها ارتباط سلبي بتركيز AOZ.
7.1 التحديد النوعي
يمكن الحصول على نطاق التركيز (نانوغرام / مل) من AOZ من مقارنة متوسط قيمة OD للعينة مع تلك الخاصة بالمحلول القياسي.بافتراض أن قيمة OD للعينة هي 0.3 ، وأن العينة هي 1.0 ، فإن قيمة OD للحلول القياسية هي: 2.243 لـ 0ppb ، 1.816 لـ 0.01ppb ، 1.415 لـ 0.03ppb ، 0.74 لـ 0.09ppb ، 0.313 لـ 0.27ppb ، 0.155 لـ 0.81ppb ، وبالتالي فإن نطاق تركيز العينة هو 0.27ppb إلى 0.81ppb ، ونطاق العينةⅡ هو 0.03ppb إلى 0.09ppb.
7.2 التحديد الكمي
يتم الحصول على القيم المتوسطة لقيم الامتصاصية لمتوسط قيمة OD (B) للعينة والحل القياسي مقسومًا على قيمة OD (B0) للحل القياسي الأول (0 قياسي) ثم يتم ضربها في 100٪ ، أي و
النسبة المئوية لقيمة الامتصاصية = | ب | × 100٪ |
ب 0 |
B - متوسط قيمة OD للعينة أو الحل القياسي
B0 - متوسط قيمة OD للحل القياسي 0 نانوغرام / مل
ارسم المنحنى القياسي بنسب الامتصاص للمحلول القياسي والقيم شبه اللوغاريتمية لمحلول AOZ القياسي (نانوغرام / مل) كمحور Y و X ، على التوالي.اقرأ التركيز المقابل للعينة من المنحنى القياسي بدمج نسبة امتصاصها في المنحنى القياسي.تُضرب القيمة الناتجة لاحقًا في طية التخفيف المقابلة ، وتحصل أخيرًا على تركيز AOZ في العينة.
8. الاحتياطات
1)ستؤدي درجة حرارة الغرفة التي تقل عن 25 درجة مئوية أو درجة حرارة الكواشف والعينات التي لا يتم إرجاعها إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) إلى انخفاض قيمة OD القياسية.
2)سيصاحب جفاف الصفيحة الدقيقة في عملية الغسيل المواقف بما في ذلك المنحنيات القياسية غير الخطية وقابلية التكاثر غير المرغوب فيها ؛لذا استمر في الخطوة التالية بعد الغسيل مباشرة.
3)تخلط بالتساوي ، وإلا سيكون هناك استنساخ غير مرغوب فيه.
4)محلول التوقف هو محلول حامض الكبريتيك 2 م ، تجنب ملامسته للجلد.
5)لا تستخدم المجموعة التي تجاوزت تاريخ انتهاء صلاحيتها.سيؤدي استخدام الكواشف المخففة أو المغشوشة من المجموعات إلى تغييرات في الحساسية وقيم الكشف عن OD.لا تستبدل الكواشف من مجموعات مجموعات مختلفة لاستخدامها.
6)ضع الصفيحة غير المستخدمة في كيس الغلق التلقائي لإعادة غلقه.المحلول القياسي وسابق الألوان عديم اللون حساسان للضوء ، وبالتالي لا يمكن تعريضهما مباشرة للضوء.
7)تجاهل محلول التلوين بأي لون يشير إلى تدهور هذا المحلول.تشير قيمة الكشف للمحلول القياسي 1 (0 جزء في البليون) التي تقل عن 0.5 إلى انحلاله.
8)درجة حرارة التفاعل المثلى هي 25 درجة مئوية ، وستؤدي درجات الحرارة العالية جدًا أو المنخفضة جدًا إلى تغييرات في حساسية الكشف وقيم OD.
9. تاريخ التخزين وانتهاء الصلاحية
التخزين: يحفظ بدرجة 2-8 ℃ ، غير مجمدة.
تاريخ انتهاء الصلاحية: 12 شهرًا ؛تاريخ الإنتاج على العلبة.
ملاحظة: إذا كان هناك تسرب في عبوة الفراغ من الصفيحة الدقيقة ، فلا تزال صالحة للاستخدام ، ولا تؤثر على نتيجة الاختبار ، واسترخي في الاستخدام.
Q1: كم من الوقت سيستغرق الشحن؟
A1: يشحن عادة خلال 7 أيام عمل.
Q2: هل تدعم OEM / ODM؟
A2: يمكن دعمها.يمكننا التخصيص وفقًا لاحتياجاتك الخاصة وكميات محددة.
Q3: كيف يفعل المصنع الخاص بك من حيث مراقبة الجودة؟
A3: لدينا شهادة ISO9001 وشهادة ISO13485 ، حتى الآن جميع عمليات الإنتاج ، لدينا قواعد قياسية ، ونحن نلتزم بالسلوك والقوانين الحكومية ذات الصلة.
س 4: هل خدمة ما بعد البيع مضمونة؟
A4: نحن نقدم خدمة ما بعد البيع التقنية المهنية عبر الإنترنت.إذا فشل المنتج أثناء التجربة ، يمكننا تقديمه
إرشادات فردية من خلال الهاتف والفيديو وأشكال أخرى.
Q5: ما هو الحد الأدنى لكمية الطلب؟
A5: 1 مجموعة.
س 6: ما هي طريقة الشحن؟
A6: يمكن شحنها عن طريق البريد السريع (FEDEX ، UPS ، DHL ، EMS ، إلخ) أو عن طريق الجو والأرض.يرجى التأكيد معنا قبل تقديم الطلب.