Nitrofuran AMOZ ELISA طقم اختبار سريع لسلامة الأغذية لحساسية الحليب 0.03ppb 96 Wells / Kit

مجموعة اختبار سلامة الغذاء Nitrofuran AMOZ ELISA لحساسية الحليب 0.03ppb 96 Wells / Kit

 

1.مجموعة اختبار سلامة الغذاء Nitrofuran AMOZ ELISAمبدأ

 

تعتمد مجموعة الكشف هذه على اختبار مناعي إنزيم تنافسي للكشف عن AMOZ في العينات.يتم تغليف المستضدات المقترنة مسبقًا على شرائط ميكروويل.يتنافس AMOZ في العينة مع المستضد المترافق المطلي مسبقًا على شريط microwell للجسم المضاد لـ AMOZ.بعد إضافة الإنزيم المتقارن ، تتم إضافة ركيزة TMB للتلطيخ.ترتبط قيمة الكثافة الضوئية (OD) لعينة ارتباطًا سلبيًا مع AMOZ فيها.تتم مقارنة هذه القيمة بمنحنى قياسي ويتم الحصول على تركيز AMOZ لاحقًا.

 

2. المواصفات الفنية

 

الحساسية: 0.03ppb

درجة حرارة التفريخ: 25 درجة مئوية

وقت الحضانة: 30 دقيقة ～ 15 دقيقة

حد الكشف الأنسجة والبيض والعسل: 0.1 جزء في المليون

معدل التفاعل المتبادل

أموز 100٪

AHD <0.1٪

AOZ <0.1٪

SEM <0.1٪

معدل الاسترداد

الأنسجة 80 ± 25٪

عسل 75 ± 25٪

بيضة 95 ± 25٪

 

3.مجموعة اختبار سلامة الغذاء Nitrofuran AMOZ ELISAعناصر

 

1	شرائط المايكرو ويل	12 شرائط قابلة للإزالة 8 كل الآبار
2	6 × محلول قياسي (1 مل لكل منهما)	0ppb	0.03ppb
		0.09ppb	0.27ppb
		0.81ppb	2.43ppb
3	انزيم متقارن	7 مل	قبعة حمراء
4	حل عمل الجسم المضاد	7 مل	كاب أزرق
5	الركيزة أ	7 مل	قبعة بيضاء
6	الركيزة ب	7 مل	غطاء أسود
7	وقف الحل	7 مل	غطاء أصفر
8	20 × عازلة غسيل مركزة	40 مل	قبعة بيضاء
9	2 × محلول إعادة تذويب مركز	50 مل	غطاء شفاف
10	2-نيتروبنزلدهيد (C7H5NO3)	2-نيتروبنزلدهيد (C7H5NO3)	2-نيتروبنزلدهيد (C7H5NO3)

 

4. المواد المطلوبة ولكن لم يتم توفيرها

 

1) المعدات: قارئ صفيحة ميكروسكوبية ، طابعة ، مجانس ، مجفف نيتروجين ، دوامة ، جهاز طرد مركزي ، أنبوب قياس ، توازن (متبادل 0.01 جرام) ، حاضنة ، حمام مائي ؛

2) الماصة المجهرية: قناة واحدة 20-200 ميكرولتر ، 100-1000 ميكرولتر ، متعدد القنوات 30-300 ميكرولتر ؛

3) الكواشف: هيدروكسيد الصوديوم ، أسيتات الإيثيل ، ن-هكسان ، حمض الهيدروكلوريك (حوالي 36.5٪) ، K2HPO4 3H2O.

 

5. عينة ما قبل المعالجة

 

إرشاد

يجب معالجة النقاط التالية قبل أي نوع من المعالجة المسبقة للعينة:

1) يمكن للتجربة استخدام النصائح التي يمكن التخلص منها فقط ، ويجب استبدال النصائح عند شفط الكواشف المختلفة ؛

2) قبل التجربة ، يجب تنظيف المعدات التجريبية وإعادة تنظيفها إذا لزم الأمر لتجنب التلوث الذي يتعارض مع نتائج التجربة.

تحضير المحلول قبل المعالجة بالعينة:

1) 0.1 م K2HPO4: قم بإذابة 11.4 جم من K2HPO4 · 3H2O في الماء منزوع الأيونات إلى 500 مل.

2) 1 م حمض الهيدروكلوريك: حل 8.6 مل من حمض الهيدروكلوريك (حوالي 36.5٪) في الماء منزوع الأيونات إلى 100 مل.

3) 1 م هيدروكسيد الصوديوم: حل 4 غرام من هيدروكسيد الصوديوم في الماء منزوع الأيونات إلى 100 مل.

4) قم بتخفيف 2 × محلول إعادة إذابة مركز بماء منزوع الأيونات عند 1: 1 (1 مل محلول إعادة إذابة مركز + 1 مل ماء منزوع الأيونات) لإذابة العينة.

 

5.1 تحضير العينات

أ) الأنسجة والبيض

1) قم بوزن 1 ± 0.05 جم من العينة المتجانسة ، أضف 4 مل من الماء المقطر ، 0.5 مل 1 م هيدروكلوريد و 100 ميكروليتر 2-نيتروبنزالديهيد (C7H5NO3) لكل أنبوب ، رج بشكل صحيح لمدة 2 دقيقة ؛.

2) احتضان في 37 ℃ خلال الليل (حوالي 16 ساعة) أو الحضانة في 56 ℃ بواسطة حمام مائي (2 ساعة).

3) أضف 5 مل 0.1 م K2HPO4 ، 0.4 مل 1 م هيدروكسيد الصوديوم و 6 مل إيثيل أسيتات لكل أنبوب ، رج لمدة 30 ثانية.

4) جهاز طرد مركزي فوق 4000 لفة / دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق (إذا كان هناك مستحلب أو طبقة أسيتات الإيثيل لا تكفي لـ 3 مل ، احتضان العينة في حمام مائي 80 درجة مئوية لمدة 10 دقائق وجهاز الطرد المركزي بشكل متكرر ؛ أو زيادة السرعة وتمديد وقت أجهزة الطرد المركزي).

5) انقل 3 مل من طبقة أسيتات الإيثيل إلى أنبوب طرد مركزي جديد وتبخر حتى يجف بالنيتروجين أو الهواء عند 50 درجة مئوية.

6) قم بإذابة المخلفات الجافة في 2 مل N-hexane ، أضف 1 مل من محلول إعادة الإذابة المخفف ، واخلطه بشكل صحيح لمدة 30 ثانية ، وأجهزة الطرد المركزي فوق 4000 دورة / دقيقة عند درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) لمدة 10 دقائق ؛قم بإزالة طور N-hexane العلوي (إذا كان هناك استحلاب ، بعد إزالة طور N-hexane العلوي ، احتضان العينة في حمام مائي 70 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة ، جهاز الطرد المركزي بشكل متكرر).

7) خذ 50 ميكرولتر من الأسفل للتحليل.

طية تخفيف العينة: 2

ب) العسل

1) قم بوزن 2 ± 0.05 جم من العينة المتجانسة (عسل) ، أضف 4 مل من الماء المقطر ، 0.5 مل 1 م هيدروكلوريد و 100 ميكرولتر 2-نيتروبنزالديهيد (C7H5NO3) لكل أنبوب ، رج جيدًا لمدة دقيقتين ؛.

2) احتضان في 37 ℃ خلال الليل (حوالي 16 ساعة) أو الحضانة في 56 ℃ بواسطة حمام مائي (2 ساعة).

3) أضف 5 مل 0.1 م K2HPO4 ، 0.4 مل 1 م هيدروكسيد الصوديوم و 6 مل إيثيل أسيتات لكل أنبوب ، رج لمدة 30 ثانية.

4) جهاز طرد مركزي فوق 4000 لفة / دقيقة في درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق (إذا كان هناك مستحلب أو طبقة أسيتات الإيثيل لا تكفي لـ 3 مل ، احتضان العينة في حمام مائي 80 درجة مئوية لمدة 10 دقائق وجهاز الطرد المركزي بشكل متكرر ؛ أو زيادة السرعة وتمديد وقت أجهزة الطرد المركزي).

5) انقل 3 مل من طبقة أسيتات الإيثيل إلى أنبوب طرد مركزي جديد وتبخر حتى يجف بالنيتروجين أو الهواء عند 50 درجة مئوية.

6) قم بإذابة المخلفات الجافة في 2 مل N-hexane ، أضف 1 مل من محلول إعادة الإذابة المخفف ، واخلط بشكل صحيح لمدة 30 ثانية ، وأجهزة الطرد المركزي فوق 4000r / min عند درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) لمدة 10 دقائق ؛قم بإزالة طور N-hexane العلوي (إذا كان هناك استحلاب ، بعد إزالة طور N-hexane العلوي ، احتضان العينة في حمام مائي 70 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة ، جهاز الطرد المركزي بشكل متكرر).

7) خذ 50 ميكرولتر من الأقل لتحليلها.

طية تخفيف العينة: 1

 

6. إجراءات ELISA

 

6.1 تعليمات

1) أحضر جميع الكواشف وشرائط الآبار الدقيقة إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) قبل الاستخدام ؛

2) أعد جميع الكواشف إلى 2-8 ℃ مباشرة بعد الاستخدام ؛

3) تعتمد قابلية استنساخ تحليل ELISA ، إلى حد كبير ، على اتساق غسل اللوحة.العملية الصحيحة لغسيل الألواح هي النقطة الأساسية في إجراءات ELISA ؛

4) بالنسبة للحضانة في درجات حرارة ثابتة ، يجب أن تتجنب جميع العينات والكواشف التعرض للضوء ، ويجب أن يتم إغلاق كل صفيحة ميكروية بواسطة غشاء الغطاء.

6.2 إجراءات التشغيل

1) أحضر مجموعة الاختبار إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 30 دقيقة على الأقل ، لاحظ أنه يجب اهتزاز كل كاشف لخلطه بالتساوي قبل الاستخدام ، ضع شرائط الآبار الدقيقة المطلوبة في إطارات الألواح.أعد ختم الصفيحة غير المستخدمة ، واحفظها في 2-8 ℃ ، غير مجمدة.

2) تحضير المحلول: خفف 40 مل من المخزن المؤقت للغسيل المركز 20 × بالماء منزوع الأيونات عند 1:19 (جزء واحد 20 × محلول غسيل مركّز + 19 جزءًا من الماء منزوع الأيونات).أو استعد حسب الحاجة.

3) الترقيم: ترقيم الآبار الدقيقة وفقًا للعينات والحل القياسي ؛يجب تنفيذ كل عينة وحل قياسي في نسختين ، وتسجيل مواقعهم.

4) أضف 50 ميكرولتر من العينة أو المحلول القياسي إلى آبار مكررة منفصلة ؛أضف 50ul إنزيم متقارن ثم 50 مايكرولتر من محلول عمل الجسم المضاد في كل بئر ، واخلط بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا.ختم صفيحة ميكروسكوبية مع غشاء الغطاء ، واحتضان في 25 لمدة 30 دقيقة.

5) صب السائل من ميكروويل ، رفرف ليجف على ورق ماص ، أضف 250 ميكرولتر / بئر من عازلة الغسيل لغسل الصفيحة لمدة 15-30 ثانية ، ثم أخرجها وقلّب لتجف بورق ماص ، كرر 4-5 مرات.(إذا كانت هناك فقاعات بعد الخفقان ، قم بقصها بالنصائح النظيفة).

6) التلوين: أضف 50 ميكرولتر من الركيزة A ثم 50 ميكرولتر من الركيزة B في كل بئر.امزج بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا ، ثم احتضانها عند 25 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة في الظلام للتلوين.

7) التحديد: أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف في كل بئر.امزج بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا.اضبط الطول الموجي لقارئ الصفيحة الدقيقة على 450 نانومتر لتحديد قيمة OD لكل بئر.(نوصي بقراءة قيمة OD عند الطول الموجي المزدوج 450/630 نانومتر في غضون 5 دقائق).

 

7. نتيجة الحكم

 

هناك طريقتان للحكم على النتائج: الطريقة الأولى هي الحكم الخام ، والثانية هي التحديد الكمي.لاحظ أن قيمة OD للعينة لها ارتباط سلبي مع تركيز AMOZ.

7.1 التحديد النوعي

يمكن الحصول على نطاق التركيز (نانوغرام / مل) من AMOZ من مقارنة متوسط ​​قيمة OD للعينة مع تلك الخاصة بالمحلول القياسي.بافتراض أن قيمة OD للعينة هي 0.3 وأن العينة هي 1.0 ، فإن قيمة OD للحلول القياسية هي: 2.243 لـ 0ppb ، و 1.816 لـ 0.03ppb ، و 1.415 لـ 0.09ppb ، و 0.74 لـ 0.27ppb ، و 0.313 لـ 0.81ppb ، 0.155 لـ 2.43ppb ، وبالتالي فإن نطاق تركيز العينة هو 0.81 إلى 2.43ppb ، ونطاق العينةⅡ هو 0.09 إلى 0.27ppb.

7.2 التحديد الكمي

يتم الحصول على القيم المتوسطة لقيم الامتصاصية لمتوسط ​​قيمة OD (B) للعينة والحل القياسي مقسومًا على قيمة OD (B0) للحل القياسي الأول (0 قياسي) ثم يتم ضربها في 100٪ ، أي و

النسبة المئوية لقيمة الامتصاصية =	ب	× 100٪
	ب 0

B - متوسط ​​قيمة OD للعينة أو الحل القياسي

B0 - متوسط ​​قيمة OD للحل القياسي 0 نانوغرام / مل

ارسم المنحنى القياسي بنسب الامتصاص للمحلول القياسي والقيم شبه اللوغاريتمية لمحلول AMOZ القياسي (نانوغرام / مل) كمحور Y و X ، على التوالي.اقرأ التركيز المقابل للعينة من المنحنى القياسي بدمج نسبة امتصاصها في المنحنى القياسي.يتم ضرب القيمة الناتجة لاحقًا في طية التخفيف المقابلة ، للحصول أخيرًا على تركيز AMOZ في العينة.

 

8. الاحتياطات

 

1) إذا كانت درجة حرارة الغرفة أقل من 25 درجة مئوية أو درجة حرارة الكاشف والعينة لا تعود إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) ، فسوف تنخفض قيمة OD القياسية.

2) أثناء عملية الغسل ، سوف يكون تجفيف الصفيحة المصغرة مصحوبًا بعدم الخطية للمنحنى القياسي ، وقابلية التكاثر ليست مثالية ؛لذلك ، انتقل إلى الخطوة التالية مباشرة بعد الغسيل.

3) تخلط جيدا ، وإلا فإن التكاثر سيكون ضعيفا.

4) محلول التوقف هو محلول حامض الكبريتيك 2 متر ، تجنب ملامسة الجلد.

5) لا تستخدم الطقم بعد انتهاء مدة الصلاحية.يمكن أن يؤدي استخدام الكواشف المخففة أو المغشوشة من المجموعة إلى تغييرات في قيم الحساسية والكشف عن OD.لا تستبدل الكواشف في دفعات مختلفة من المجموعات.

6) إعادة ختم الألواح الدقيقة غير المستخدمة في أكياس زيبلوك.المحاليل القياسية والقارنات عديمة اللون حساسة للضوء ولا يمكن تعريضها مباشرة للضوء.

7) تجاهل أي محلول تلوين يشير لونه إلى تدهور المحلول.تشير قيمة الكشف التي تقل عن 0.5 للحل القياسي 1 (0 جزء في البليون) إلى تدهور.

8) درجة حرارة التفاعل المثلى هي 25 ℃ ، وستتغير حساسية الكشف وقيمة OD إذا كانت درجة الحرارة مرتفعة جدًا أو منخفضة جدًا.

 

9. تاريخ التخزين وانتهاء الصلاحية

 

التخزين: يحفظ بدرجة 2-8 ℃ ، غير مجمدة.

تاريخ انتهاء الصلاحية: 12 شهرًا ؛تاريخ الإنتاج على العلبة.

ملاحظة: إذا كان هناك تسرب في عبوة الفراغ من الصفيحة الدقيقة ، فلا تزال صالحة للاستخدام ، ولا تؤثر على نتيجة الاختبار ، واسترخي في الاستخدام.

 

 

Q1: متى سيتم شحنها؟
A1: سنقوم بشحن البضائع لك في أقرب وقت ممكن في غضون 7 أيام عمل بعد استلام الدفع.(في حالة وجود عوامل خارجية مثل الوباء ، قد يتأخر التسليم)

 

Q2: هل يدعم OEM / ODM؟
ج 2: يمكن دعمها ، لكن الكمية المحددة يجب أن تكون أكثر من 100000 قطعة ، وهو أمر مناسب للمنتجات المخصصة.

 

Q3: كيف يفعل المصنع الخاص بك من حيث مراقبة الجودة؟
A3: لقد حصلنا على شهادات ISO9001 و ISO13485 على الصعيد الوطني.تتوافق عملية الإنتاج لدينا مع الإجراءات القياسية لضمان الجودة المثلى للمنتج.

 

Q4: كيفية تقديم خدمة ما بعد البيع؟
A4: نحن نقدم خدمة ما بعد البيع التقنية المهنية عبر الإنترنت.يمكننا تزويدك بإرشادات فردية عبر الفيديو والهاتف وما إلى ذلك.

 

س 5: ما هي طريقة الدفع؟
A5: نتلقى الدفع عن طريق T / T.

 

س 6: كيفية الشحن؟
ج 6: اختر أفضل طريقة شحن لك من خلال الحصول على عروض أسعار من العديد من شركات النقل المتعاونة لدينا ، وكذلك الشحن وفقًا لمتطلباتك.