اترك رسالة
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
من فضلك تفقد بريدك الالكتروني!
مزيد من المعلومات يسهل التواصل بشكل أفضل.
تم الإرسال بنجاح!
اترك رسالة
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
من فضلك تفقد بريدك الالكتروني!
بحجم: | 16.7 * 11.5 * 10.2 سم | مدة الصلاحية: | 12 شهر |
---|---|---|---|
الكلمات الدالة: | مجموعة اختبار Nitrofuran SEM ELISA | تخصيص: | 96 ويلز / كيت |
أداء العينة: | سمك ، جمبري ، دجاج / كبد ، عسل ، بيض ، لبن | يكتب: | طقم اختبار سريع لسلامة الغذاء |
الحساسية (جزء في البليون): | 0.02 جزء في البليون | فترة حضانة: | 30 دقيقة - 15 دقيقة |
إبراز: | مجموعة اختبار سلامة الغذاء Green Spring,مجموعة اختبار سلامة الغذاء 0.02 ppb,اختبار فحص الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم لمدة 15 دقيقة |
مجموعة اختبار سلامة الغذاء Nitrofuran SEM ELISA لحساسية الحليب 0.02ppb 96 Well / Kit
1. مبدأ Nitrofuran SEM ELISA لسلامة الأغذية
تعتمد مجموعة الاختبار هذه على المقايسة المناعية للإنزيم التنافسي للكشف عن النيتروفوران (SEM) في العينة.يتم طلاء مستضدات التوصيل مسبقًا على خطوط البئر الصغيرة.يتنافس Nitrofuran (SEM) في العينة ومستضدات الاقتران المطلية مسبقًا على خطوط الآبار الدقيقة على الأجسام المضادة لـ SEM.بعد إضافة الإنزيم المتقارن ، تتم إضافة ركيزة TMB للتلوين.قيمة الكثافة البصرية (OD) للعينة لها ارتباط سلبي مع SEM فيها.تتم مقارنة هذه القيمة بالمنحنى القياسي ويتم الحصول على تركيز SEM لاحقًا.
2. المواصفات الفنية
الحساسية: 0.02ppb
درجة حرارة التفريخ: 25 درجة مئوية
وقت الحضانة: 30 دقيقة ~ 15 دقيقة
حد الكشف الأنسجة والبيض والعسل: 0.1 جزء في المليون
معدل التفاعل المتبادل
SEM 100٪
AMOZ <0.1٪
AOZ <0.1٪
AHD <0.1٪
معدل الاسترداد
الأنسجة 75 ± 25٪
عسل 70 ± 20٪
بيضة 95 ± 25٪
3. Nitrofuran SEM ELISA مكونات طقم اختبار سلامة الأغذية
1 | شرائط المايكرو ويل |
12 شرائط قابلة للإزالة 8 كل الآبار |
|
2 | 6 × محلول قياسي (1 مل لكل منهما) | 0ppb | 0.02ppb |
0.06ppb | 0.18ppb | ||
0.54ppb | 1.62ppb | ||
3 | انزيم متقارن | 7 مل | قبعة حمراء |
4 | حل عمل الجسم المضاد | 7 مل | كاب أزرق |
5 | الركيزة أ | 7 مل | قبعة بيضاء |
6 | الركيزة ب | 7 مل | غطاء أسود |
7 | وقف الحل | 7 مل | غطاء أصفر |
8 | 20 × عازلة غسيل مركزة | 40 مل | قبعة بيضاء |
9 | 2 × محلول إعادة تذويب مركز | 50 مل | غطاء شفاف |
10 | 2-نيتروبنزلدهيد (C7H5NO3) | 10 مل | غطاء أسود |
4. المواد المطلوبة ولكن لم يتم توفيرها
1) المعدات: قارئ الصفيحة الدقيقة ، الطابعة ، المجانس ، جهاز تجفيف النيتروجين ، الدوامة ، الطرد المركزي ، ماصات القياس ، التوازن (حساسية متبادلة 0.01 جم) ، حاضنة ، حمام مائي ؛
2) Micropipettors: أحادية القناة 20-200 ميكرولتر ، 100-1000 ميكرولتر ، ومتعددة القنوات 30 300 ميكرولتر ؛
3) الكواشف: هيدروكسيد الصوديوم ، أسيتات الإيثيل ، n-Hexane ، HCI (36.5٪ تقريبًا) ، K2HPO4 · 3H2O.
5. عينة ما قبل المعالجة
تعليمات
يجب التعامل مع النقاط التالية قبل المعالجة المسبقة لأي نوع من العينات:
1) يمكن استخدام النصائح التي يمكن التخلص منها فقط للتجارب ويجب تغيير النصائح عند استخدامها لامتصاص الكواشف المختلفة ؛
2) قبل التجربة ، يجب أن تكون كل المعدات التجريبية نظيفة ويجب إعادة تنظيفها إذا لزم الأمر ، وذلك لتجنب التلوث الذي يتعارض مع نتائج التجربة.
تحضير المحلول قبل المعالجة المسبقة للعينة:
1) 0.1 م K2HPO4: حل 11.4 جم K2HPO4 · 3H2O في الماء منزوع الأيونات إلى 500 مل.
2) 1 M حمض الهيدروكلوريك: حل 8.6 مل HCI (حوالي 36.5٪) في الماء منزوع الأيونات إلى 100 مل.
3) 1 م هيدروكسيد الصوديوم: حل 4 جم هيدروكسيد الصوديوم في الماء منزوع الأيونات إلى 100 مل.
4) يتم تخفيف محلول إعادة الإذابة المركز 2 × بالماء منزوع الأيونات عند 1: 1 (1 مل من محلول إعادة الإذابة المركز + 1 مل من الماء منزوع الأيونات) ، ويستخدم في إعادة إذابة العينة.
5.1 تحضير العينات
أ) الأنسجة والبيض
1) قم بوزن 1 ± 0.05 جم من العينة المتجانسة ، أضف 4 مل من الماء المقطر ، 0.5 مل 1 م هيدروكلوريد و 100 ميكروليتر 2-نيتروبنزالديهيد (C7H5NO3) لكل أنبوب ، رج بشكل صحيح لمدة 2 دقيقة ؛.
2) احتضان في 37 ℃ خلال الليل (حوالي 16 ساعة) أو الحضانة في 56 ℃ بواسطة حمام مائي (2 ساعة).
3) أضف 5 مل 0.1 م K2HPO4 ، 0.4 مل 1 م هيدروكسيد الصوديوم و 6 مل إيثيل أسيتات لكل أنبوب ، رج لمدة 30 ثانية.
4) جهاز طرد مركزي فوق 4000 لفة / دقيقة عند درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق (إذا كان هناك مستحلب أو طبقة أسيتات الإيثيل لا تكفي لـ 3 مل ، احتضان العينة في حمام مائي 80 درجة مئوية لمدة 10 دقائق وجهاز الطرد المركزي بشكل متكرر ؛ أو زيادة السرعة وتمديد وقت أجهزة الطرد المركزي).
5) انقل 3 مل من طبقة أسيتات الإيثيل إلى أنبوب طرد مركزي جديد وتبخر حتى يجف بالنيتروجين أو الهواء عند 50 درجة مئوية.
6) قم بإذابة المخلفات الجافة في 2 مل N-hexane ، أضف 1 مل من محلول إعادة الإذابة المخفف ، واخلطه بشكل صحيح لمدة 30 ثانية ، وأجهزة الطرد المركزي فوق 4000 دورة / دقيقة عند درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) لمدة 10 دقائق ؛قم بإزالة طور N-hexane العلوي (إذا كان هناك استحلاب ، بعد إزالة طور N-hexane العلوي ، احتضان العينة في حمام مائي 70 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة ، جهاز الطرد المركزي بشكل متكرر).
7) خذ 50 ميكرولتر من الأقل لتحليلها.
طية تخفيف العينة: 2
ب) العسل
1) قم بوزن 2 ± 0.05 جم من العينة المتجانسة (عسل) ، أضف 4 مل من الماء المقطر ، 0.5 مل 1 م هيدروكلوريد و 100 ميكرولتر 2-نيتروبنزالديهيد (C7H5NO3) لكل أنبوب ، رج جيدًا لمدة دقيقتين ؛.
2) احتضان في 37 ℃ خلال الليل (حوالي 16 ساعة) أو الحضانة في 56 ℃ بواسطة حمام مائي (2 ساعة).
3) أضف 5 مل 0.1 م K2HPO4 ، 0.4 مل 1 م هيدروكسيد الصوديوم و 6 مل إيثيل أسيتات لكل أنبوب ، رج لمدة 30 ثانية.
4) جهاز طرد مركزي فوق 4000 لفة / دقيقة عند درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 10 دقائق (إذا كان هناك مستحلب أو طبقة أسيتات الإيثيل لا تكفي لـ 3 مل ، احتضان العينة في حمام مائي 80 درجة مئوية لمدة 10 دقائق وجهاز الطرد المركزي بشكل متكرر ؛ أو زيادة السرعة وتمديد وقت أجهزة الطرد المركزي).
5) انقل 3 مل من طبقة أسيتات الإيثيل إلى أنبوب طرد مركزي جديد وتبخر حتى يجف بالنيتروجين أو الهواء عند 50 درجة مئوية.
6) قم بإذابة المخلفات الجافة في 2 مل N-hexane ، أضف 1 مل من محلول إعادة الإذابة المخفف ، واخلط بشكل صحيح لمدة 30 ثانية ، وأجهزة الطرد المركزي فوق 4000r / min عند درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) لمدة 10 دقائق ؛قم بإزالة طور N-hexane العلوي (إذا كان هناك استحلاب ، بعد إزالة طور N-hexane العلوي ، احتضان العينة في حمام مائي 70 درجة مئوية لمدة 10-20 دقيقة ، جهاز الطرد المركزي بشكل متكرر).
7) خذ 50 ميكرولتر من الأقل لتحليلها.
طية تخفيف العينة: 1
6. إجراءات ELISA
6.1 تعليمات
1) أحضر جميع الكواشف وشرائط الآبار الدقيقة إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) قبل الاستخدام ؛
2) أعد جميع الكواشف إلى 2-8 ℃ مباشرة بعد الاستخدام ؛
3) تعتمد قابلية استنساخ تحليل ELISA ، إلى حد كبير ، على اتساق غسل اللوحة.العملية الصحيحة لغسيل الألواح هي النقطة الأساسية في إجراءات ELISA ؛
4) بالنسبة للحضانة في درجات حرارة ثابتة ، يجب أن تتجنب جميع العينات والكواشف التعرض للضوء ، ويجب أن يتم إغلاق كل صفيحة ميكروية بواسطة غشاء الغطاء.
6.2 إجراءات التشغيل
1) ضع المجموعة في درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 30 دقيقة على الأقل ، لاحظ أنه يجب رج كل كاشف وخلطه جيدًا قبل الاستخدام ، ثم ضع شرائح الميكروويل المطلوبة في إطار اللوحة.يجب إعادة إحكام غلق الألواح الدقيقة غير المستخدمة وتخزينها في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية ، وليس مجمدة.
2) تحضير المحلول: خذ 40 مل من 20 × محلول غسيل مركز وقم بتخفيفه بالماء منزوع الأيونات عند 1:19 (جزء واحد من 20 × عازلة غسيل مركزة + 19 جزءًا من الماء منزوع الأيونات).أو استعد حسب الحاجة.
3) الترقيم: ترقيم الميكروويلات وفقًا للعينات والحلول القياسية ؛يجب عمل كل عينة وحل قياسي من نسختين ، ويجب تسجيل مواقفهم.
4) أضف 50 ميكرولتر من العينة أو المحلول القياسي لتكرار الآبار ؛أضف 50ul من الإنزيم المتقارن إلى كل بئر ، ثم أضف 50 ميكرولتر من محلول عمل الجسم المضاد ، ورج الطبق لخلطه برفق.ختم صفيحة ميكروسكوبية بفيلم غطاء واحتضان عند 25 درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.
5) اسكب السائل في الميكروويل ، واتركه حتى يجف على ورق ماص ، أضف 250 ميكرولتر / بئر من المخزن المؤقت للغسيل لغسل لوحة الميكروويل لمدة 15-30 ثانية ، ثم أخرجه واتركه حتى يجف بورق ماص ، كرر 4-5 مرات.(إذا كانت هناك فقاعات هواء بعد النقر ، اقطعها برأس نظيف).
6) تطوير اللون: أضف 50 ميكرولتر من الركيزة A و 50 ميكرولتر من الركيزة B لكل بئر.رج اللوح باليد لخلطه بلطف واحتضانه عند 25 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة في الظلام لتطوير اللون.
7) الفحص: أضف 50 ميكرولتر من محلول التوقف لكل بئر.تخلط بلطف عن طريق هز الطبق باليد.اضبط الطول الموجي لقارئ الصفيحة الدقيقة على 450 نانومتر لتحديد قيمة OD لكل بئر.(يوصى بقراءة قيمة OD عند الطول الموجي المزدوج 450/630 نانومتر في غضون 5 دقائق).
7. نتيجة الحكم
هناك طريقتان للحكم على النتائج: الطريقة الأولى هي الحكم الخام ، والثانية هي التحديد الكمي.لاحظ أن قيمة OD للعينة لها ارتباط سلبي بمحتوى SEM.
7.1 التحديد النوعي
يمكن الحصول على نطاق التركيز (نانوغرام / مل) من مقارنة متوسط قيمة OD للعينة مع تلك الخاصة بالمحلول القياسي.بافتراض أن قيمة OD للعينة هي 0.3 ، وأن العينة هي 1.0ppb ، فإن قيمة OD للحلول القياسية هي: 2.243 لـ 0ppb ، 1.816 لـ 0.02ppb ، 1.415 لـ 0.06ppb ، 0.74 لـ 0.18ppb ، 0.313 لـ 0.54 ppb ، 0.155 لـ 1.62ppb ، وبالتالي فإن نطاق تركيز العينة هو 0.54 إلى 1.62ppb ، ونطاق العينةⅡ هو 0.06 إلى 0.18ppb.
7.2 التحديد الكمي
يتم الحصول على القيم المتوسطة لقيم الامتصاصية لمتوسط قيمة OD (B) للعينة والحل القياسي مقسومًا على قيمة OD (B0) للحل القياسي الأول (0 قياسي) ثم يتم ضربها في 100٪ ، أي و
النسبة المئوية لقيمة الامتصاصية = | ب | × 100٪ |
ب 0 |
ب- متوسط (بئر مزدوجة) قيمة OD للعينة أو المحلول القياسي
B0 - متوسط قيمة OD للحل القياسي 0ng / mL
ارسم المنحنى القياسي بنسب الامتصاص للحل القياسي والقيم شبه اللوغاريتمية لمحلول SEM القياسي (نانوغرام / مل) كمحور Y و X ، على التوالي.اقرأ التركيز المقابل للعينة من المنحنى القياسي بدمج نسبة امتصاصها في المنحنى القياسي.يتم ضرب القيمة الناتجة لاحقًا في طية التخفيف المقابلة ، للحصول أخيرًا على تركيز SEM في العينة.
8. الاحتياطات
1) إذا كانت درجة حرارة الغرفة أقل من 25 درجة مئوية أو درجة حرارة الكاشف والعينة لا تعود إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) ، فسوف تنخفض قيمة OD القياسية.
2) أثناء عملية الغسل ، سوف يكون تجفيف الصفيحة المصغرة مصحوبًا بعدم الخطية للمنحنى القياسي ، وقابلية التكاثر ليست مثالية ؛لذلك ، انتقل إلى الخطوة التالية مباشرة بعد الغسيل.
3) تخلط جيدا ، وإلا فإن التكاثر سيكون ضعيفا.
4) محلول التوقف هو محلول حامض الكبريتيك 2 متر ، تجنب ملامسة الجلد.
5) لا تستخدم الطقم بعد انتهاء مدة الصلاحية.يمكن أن يؤدي استخدام الكواشف المخففة أو المغشوشة من المجموعة إلى تغييرات في قيم الحساسية والكشف عن OD.لا تستبدل الكواشف في دفعات مختلفة من المجموعات.
6) إعادة ختم الألواح الدقيقة غير المستخدمة في أكياس زيبلوك.المحاليل القياسية والقارنات عديمة اللون حساسة للضوء ولا يمكن تعريضها مباشرة للضوء.
7) تجاهل أي محلول تلوين يشير لونه إلى تدهور المحلول.تشير قيمة الكشف التي تقل عن 0.5 للحل القياسي 1 (0 جزء في البليون) إلى تدهور.
8) درجة حرارة التفاعل المثلى هي 25 ℃ ، وستتغير حساسية الكشف وقيمة OD إذا كانت درجة الحرارة مرتفعة جدًا أو منخفضة جدًا.
9. تاريخ التخزين وانتهاء الصلاحية
التخزين: يحفظ في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية ، ولا يجوز التجميد.
تاريخ انتهاء الصلاحية: 12 شهرًا ؛تاريخ الإنتاج على الصندوق.
ملاحظة: في حالة تسرب عبوة فراغ الصفيحة الميكروسكوبية ، فلا يزال من الممكن استخدامها دون التأثير على نتائج الاختبار ، لذا يمكنك استخدامها بثقة.
Q1: متى سيتم شحنها؟
A1: سنقوم بشحن البضائع لك في أقرب وقت ممكن في غضون 7 أيام عمل بعد استلام الدفع.(في حالة وجود عوامل خارجية مثل الوباء ، قد يتأخر التسليم)
Q2: هل يدعم OEM / ODM؟
ج 2: يمكن دعمها ، لكن الكمية المحددة يجب أن تكون أكثر من 100000 قطعة ، وهو أمر مناسب للمنتجات المخصصة.
Q3: كيف يفعل المصنع الخاص بك من حيث مراقبة الجودة؟
A3: لقد حصلنا على شهادات ISO9001 و ISO13485 على الصعيد الوطني.تتوافق عملية الإنتاج لدينا مع الإجراءات القياسية لضمان الجودة المثلى للمنتج.
Q4: كيفية تقديم خدمة ما بعد البيع؟
A4: نحن نقدم خدمة ما بعد البيع التقنية المهنية عبر الإنترنت.يمكننا تزويدك بإرشادات فردية عبر الفيديو والهاتف وما إلى ذلك.
س 5: ما هي طريقة الدفع؟
A5: نتلقى الدفع عن طريق T / T.
س 6: كيفية الشحن؟
ج 6: اختر أفضل طريقة شحن لك من خلال الحصول على عروض أسعار من العديد من شركات النقل المتعاونة لدينا ، وكذلك الشحن وفقًا لمتطلباتك.