طقم اختبار ELISA البيطري لمرض البروسيلات لكلب خنزير الماعز والأغنام البقري

داء البروسيلات البيطري طقم اختبار ELISA للأبقار الماعز والأغنام والكلب

 

أجسام البروسيلات ELISA Kit للأبقار الماعز والأغنام والكلب 96 ويل / عدة

 

1 المقدمة

تستخدم مجموعة ELISA للجسم المضاد لمرض البروسيلات لاختبار الأجسام المضادة لمرض الحمى المالطية في مصل الأبقار والماعز والأغنام والخنازير والكلاب ، إلخ.
تستخدم هذه المجموعة طريقة ELISA التنافسية ، مستضد البروسيلا مغلف مسبقًا على شرائط إنزيم دقيقة.عند الاختبار ، أضف عينة مصل مخفف ، بعد الحضانة ، إذا كان هناك جسم مضاد خاص بمرض البروسيلا ، فسوف يتحد مع المستضد المغلف مسبقًا ، ويتخلص من الجسم المضاد غير المنضم والمكونات الأخرى بالغسيل ؛ثم إضافة الجسم المضاد أحادي النسيلة المضاد لفيروس البروسيلات المسمى بالإنزيم ، ويمنع الجسم المضاد في العينة مزيجًا من الأجسام المضادة أحادية النسيلة والمستضد المطلي مسبقًا ؛تخلص من الإنزيم المترافق مع الغسيل ؛أضف ركيزة TMB في الآبار الدقيقة ، تكون الإشارة الزرقاء بواسطة تحفيز الإنزيم في نسبة عكسية لمحتوى الجسم المضاد في العينة ، استخدم قارئ ELISA عند 450 نانومتر موجة الطول لقياس الامتصاص A قيمة في آبار التفاعل بعد إضافة محلول التوقف لإيقاف التفاعل.

2. الكواشف والمحتويات

 

شفرة	غرض	المواصفات	شفرة	غرض	المواصفات
1	صفائح مطلية بداء البروسيلات- Ag 96 Wells	1/2 طبق	7	وقف الحل	15 مل
2	انزيم مترافق	10/20 مل	8	سيطرة سلبية	200 ميكرولتر
3	10X عازلة غسيل مركزة	100 مل	9	مراقبة إيجابية	60 ماي
4	المادة المتفاعلة	11/22 مل	10	رقائق لاصقة	2/4 قطعة
5	عينة مخفف	100 مل	11	ورقة التعليمات	1 قطعة
6	لوحة تخفيف المصل	1/2 قطعة

 

3. لم يتم توفير المواد المطلوبة

1) الماصة المجهرية: 10ul-100ul ، 100ul-1000ul.
2) نصائح ماصة يمكن التخلص منها.
3) الخريجين: 500 مل.
4) قارئ الأطباق الدقيقة: 96 بئراً.
5) الماء المقطر أو الماء منزوع الأيونات.
6) غسالة ميكروسكوبية

4. تحضير العينة

خذ دم الحيوان الكامل ، واحصل على المصل بالطريقة العادية ، يجب أن يكون المصل ساطعًا ولا يوجد انحلال للدم.

5. غسل إعداد العازلة

أعد محلول الغسيل المركز 10 × إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام ، إذا كان هناك بلورات ملح ، قم برجه حتى يذوب ، ثم خفف 10 مرات بالماء المقطر أو الماء منزوع الأيونات.يمكن تخزين المخزن المؤقت للغسيل المخفف عند 4 درجات مئوية لمدة أسبوع تقريبًا.

 

 

6. ملاحظات

 

1) أعد جميع الكواشف إلى درجة حرارة الغرفة قبل الاستخدام ، ورجها جيدًا قبل الاستخدام ، واحفظها في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية بعد الاستخدام.
2) لا تخلط الكواشف من مجموعات ودفعات مختلفة لمنع تلوث الكواشف أثناء الاستخدام.
3) قد يكون محلول الركيزة والإيقاف مزعجًا للجلد والعينين ، يرجى استخدامه بحذر.
4) لا تعرض الركيزة لضوء قوي وتجنب ملامسة العوامل المؤكسدة.
5) يجب أن تكون ألواح البروسيلا المطلية بالفضة محكمة الغلق ضد الرطوبة.أعد ألواح MicroWell غير المستخدمة إلى أكياس رقائق معدنية جافة وختمها في درجة حرارة 2-8 درجة مئوية.
6) يجب التعامل مع جميع النفايات جيدًا قبل التخلص منها لتجنب التلوث.
7) اتبع بدقة تعليمات التشغيل للحصول على أفضل النتائج.يجب أن تكون سحب العينات والتوقيت والتنظيف دقيقة طوال العملية.
8) يمكن التخلص من الألواح المطلية بداء البروسيلات - Ag ، ولا يعاد استخدامها.

7. إجراء الاختبار

1) على لوحة تخفيف المصل ، قم بتخفيف المصل ، والتحكم السلبي والتحكم الإيجابي بنسبة 1:40 (على سبيل المثال: تخفيف عينة 195ul + عينة مصل 5ul) ، واخلط جيدًا ؛
2) خذ الصفيحة المطلية بالبروسيلا أغ (افتح وقم بقياس الكمية المطلوبة حسب العينة) ، أضف المصل المخفف إلى آبار الاختبار ، 20ul / بئر ؛في الوقت نفسه ، قم بتعيين بئر واحد للتحكم الإيجابي وبئرين للتحكم السلبي ، على التوالي في آبارهم ، أضف تحكمًا سلبيًا مخففًا وتحكم إيجابيًا مخففًا ، 20ul / بئر ؛
3) أضف Enzyme Conjugate ، 80ul / well ، ورجه بلطف ، وقم بتغطيته بمادة ذاتية اللصق ، واحتضان عند 37 درجة مئوية لمدة 60 دقيقة ؛
4) افتح الرقاقة ذاتية اللصق ، واسكب السائل في البئر ، وأضف محلول الغسيل المخفف لكل بئر ، 250ul / بئر ، اسكب السائل ، كرر الخطوات المذكورة أعلاه 4-6 مرات ، وأخيراً استخدم الورق الماص للقلب الغطاء ليجف
5) أضف الركيزة ، 100ul / جيد ، واخلطها جيدًا ، وقم بتغطيتها بمادة ذاتية اللصق ، واحتضانها عند 37 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة في الظلام ؛
6) أضف محلول الإيقاف ، 50ul / well لإيقاف التفاعل ، وقم بقياس النتيجة في 10 دقائق.

 

8. نتائج الحكم

 

يتم ضبط آبار التحكم الفارغة على الصفر ويتم قراءة قيمة OD عند 450 نانومتر (630 نانومتر هو المرجع).
لكي يعمل الكشف:
قيمة OD للتحكم السلبي (N)> 0.5 ، في حين أن معدل حجب القيمة الإيجابية (P)> 80٪
طريقة حساب:
PI (معدل الحجب) = {1- (قيمة OD / قيمة متوسط ​​OD للتحكم السلبي)} × 100٪
تفسير النتائج
PI (معدل الانسداد)> 70٪: إيجابي
PI (معدل الحجب) ≤ 70٪: سلبي

9. تاريخ التخزين وانتهاء الصلاحية

تخزين في 2 ~ 8 في الظلام ، غير مجمد ، تاريخ انتهاء الصلاحية: 12 شهرا.

 

المظاهر السريرية

المظاهر السريرية لهذا المرض متغيرة.بالنسبة للمرضى الفرديين ، يمكن أن تكون مظاهره السريرية بسيطة ، حيث تظهر فقط خراجًا موضعيًا ، أو معقدًا للغاية ، وتظهر أعضاء وأنظمة متعددة متورطة في نفس الوقت.الحمى المالطية من نوع الأغنام ونوع الخنازير خطيرة في الغالب ، بينما تكون أعراض نوع الأبقار خفيفة ، وبعض الحالات قد لا تكون مصحوبة بالحمى.داء البروسيلات في الأغنام هو أكثر الأمراض شيوعًا في الصين.المسار الطبيعي للمرضى غير المعالجين هو 3-6 أشهر (متوسط ​​4 أشهر) ، ولكن يمكن أن يكون قصيرًا مثل شهر واحد أو عدة سنوات.يمكن أن يكون مسار المرض بشكل عام حادًا ومزمنًا ، وغالبًا ما تكون المرحلة الحادة من النوع البقري غير واضحة.تتراوح فترة الحضانة من 7 إلى 60 يومًا ، وعمومًا من 2 إلى 3 أسابيع ، ويصاب عدد قليل من المرضى بالمرض بعد عدة أشهر أو أكثر بعد الإصابة.يأتي معظم المصابين في المختبر في غضون 10 إلى 50 يومًا.

الأمراض المعدية تحت الحادة والحادة

حوالي 10 ٪ ~ 30 ٪ من المرضى لديهم بداية مفاجئة.يعاني عدد قليل من المرضى من الأعراض البادرية لعدة أيام ، مثل الضعف ، والأرق ، وانخفاض درجة الحرارة ، وفقدان الشهية ، والتهاب الجهاز التنفسي العلوي ، وما إلى ذلك. المظاهر السريرية الرئيسية في المرحلة الحادة هي الحمى ، وفرط التعرق ، والتعب ، والتهاب المفاصل ، والتهاب الخصيتين ، إلخ.

(1) أكثر أنواع الحرارة شيوعًا هو نوع الاسترخاء.على الرغم من أن النوع المتموج لا يمثل سوى 5٪ إلى 20٪ ، إلا أنه الأكثر تميزًا.تنتشر الحمى من 2 إلى 3 أسابيع ، تليها 3 إلى 5 أيام إلى أسبوعين من عدم وجود فترة حرارة ، ثم ترتفع الحرارة مرة أخرى ، لذلك تتقلب الدورة وتفترض النوع المتموج ؛معظم المرضى لديهم 2-3 موجات فقط ، وأحيانًا أكثر من 10. أنواع الحرارة الأخرى تشمل النوع غير المنتظم والحمى المنخفضة المستمرة.

(2) فرط التعرق هو العرض البارز لهذا المرض ، وهو أكثر وضوحا من الأمراض الساخنة الأخرى.غالبًا في وقت متأخر من الليل وفي الصباح الباكر ، تنخفض الحرارة فجأة وتتعرق بغزارة.يشعر معظم المرضى بالضعف والضعف.

(3) غالبًا ما تجعل آلام المفاصل المرضى يتأوهون ويشعرون بألم لا يطاق.يمكن أن يشمل مفصلًا واحدًا أو أكثر ، وخاصةً المفصل العجزي الحرقفي والورك والركبة والكتف والمعصم والكوع والمفاصل الكبيرة الأخرى.في المرحلة الحادة ، يمكن أن تكون مهاجرة.يكون الألم مخروطي الشكل ، والمسكنات العامة غير فعالة.يعاني بعض المرضى من احمرار وتورم في المفاصل وتقيّح على الجانب.التورم الموضعي مثل التهاب الجراب والتهاب غمد الوتر والتهاب حوائط المفصل شائع أيضًا.يُعد ألم العضلات أكثر شيوعًا في كل من الفخذين والأرداف ، مما قد يسبب ألمًا تشنجيًا.

(4) التهاب الخصية هو أيضًا أحد الأعراض المميزة لمرض البروسيلا.وهو ناتج عن إصابة الخصية والبربخ.غالبًا ما تكون أحادية الجانب ويمكن أن تكون بحجم بيضة الإوزة مع حنان واضح.

(5) تشمل الأعراض الثانوية الصداع ، والألم العصبي ، وتضخم الكبد والطحال ، واعتلال العقد اللمفية ، وما إلى ذلك. الطفح الجلدي نادر نسبيًا.

 

 

 

 

Q1: كم من الوقت سيستغرق الشحن؟
A1: يشحن عادة خلال 7 أيام عمل.

 

Q2: هل تدعم OEM / ODM؟
A2: يمكن دعمها.يمكننا التخصيص وفقًا لاحتياجاتك الخاصة وكميات محددة.

 

Q3: كيف يفعل المصنع الخاص بك من حيث مراقبة الجودة؟
A3: لدينا شهادة ISO9001 وشهادة ISO13485 ، حتى الآن جميع عمليات الإنتاج ، لدينا قواعد قياسية ، ونحن نمتثل للسلوك والقوانين الحكومية ذات الصلة.

 

س 4: هل خدمة ما بعد البيع مضمونة؟
A4: نحن نقدم خدمة ما بعد البيع التقنية المهنية عبر الإنترنت.إذا فشل المنتج أثناء التجربة ، يمكننا تقديمه
إرشادات فردية من خلال الهاتف والفيديو وأشكال أخرى.

 

Q5: ما هو الحد الأدنى لكمية الطلب؟
A5: 1 مجموعة.

 

س 6: ما هي طريقة الشحن؟
A6: يمكن شحنها عن طريق البريد السريع (FEDEX ، UPS ، DHL ، EMS ، إلخ) أو عن طريق الجو والأرض.يرجى التأكيد معنا قبل تقديم الطلب.