اترك رسالة
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
من فضلك تفقد بريدك الالكتروني!
مزيد من المعلومات يسهل التواصل بشكل أفضل.
تم الإرسال بنجاح!
اترك رسالة
يجب أن تكون رسالتك بين 20-3000 حرف!
من فضلك تفقد بريدك الالكتروني!
أداء العينة: | عسل | الحساسية (جزء في البليون): | 0.05 جزء في البليون |
---|---|---|---|
تخصيص: | 96 بئرا / عدة | الكلمات الدالة: | طقم اختبار الميترونيدازول إليسا |
يكتب: | طقم إليسا التشخيصي | تخزين: | يحفظ في درجة حرارة 2-8 ℃ ، غير مجمد. |
إبراز: | مجموعة الكشف السريع عن الأجسام المضادة للعسل,مجموعة الكشف السريع عن الأجسام المضادة 96 Wells / Kit,مجموعة اختبار ELISA 0.05 ppb |
طقم اختبار الميترونيدازول إليسا للعسل 96 بئراً / حساسية المجموعة 0.05 جزء في البليون
1. المبدأ
تعتمد مجموعة الاختبار هذه على المقايسة المناعية للإنزيم التنافسي للكشف عن الميترونيدازول في العينة.يتم طلاء مستضدات التوصيل مسبقًا على خطوط البئر الصغيرة.يتنافس الميترونيدازول في العينة ومستضدات الاقتران المطلية مسبقًا على خطوط الآبار الدقيقة على الأجسام المضادة المضادة للميترونيدازول.بعد إضافة الإنزيم المتقارن ، تتم إضافة ركيزة TMB للتلوين.قيمة الكثافة البصرية (OD) للعينة لها ارتباط سلبي مع الميترونيدازول فيها.تتم مقارنة هذه القيمة بالمنحنى القياسي ويتم الحصول على تركيز الميترونيدازول لاحقًا.
2. المواصفات الفنية
الحساسية: 0.05ppb
حد الكشف
العسل: حوالي 0.1 جزء في المليون
ملحوظة: جزء في البليون = نانوغرام / مل أو نانوغرام / غرام
معدل التفاعل المتبادل:
ميترونيدازول 100٪
أورنيدازول 83٪
سيكنيدازول 110٪
ميترونيدازول أوه <1٪
تينيدازول <1٪
ديميتريدازول <1٪
معدل الاسترداد: 90 ± 30٪
3. المكونات
1 | شرائط المايكرو ويل |
12 شرائط قابلة للإزالة 8 كل الآبار |
|
2 | 6 × محلول قياسي (1 مل لكل منهما) | 0 جزء في البليون | 0.05 جزء في البليون |
0.15 جزء في البليون | 0.45 جزء في البليون | ||
1.35 جزء في البليون | 4.05 جزء في البليون | ||
3 | انزيم متقارن | 12 مل | قبعة حمراء |
4 | حل عمل الجسم المضاد | 7 مل | كاب أزرق |
5 | الركيزة أ | 7 مل | قبعة بيضاء |
6 | الركيزة ب | 7 مل | غطاء أسود |
7 | وقف الحل | 7 مل | غطاء أصفر |
8 | 20 × عازلة غسيل مركزة | 30 مل | قبعة بيضاء |
9 | حل إعادة الحل | 50 مل | غطاء شفاف |
4. المواد المطلوبة ولكن لم يتم توفيرها
1) المعدات: قارئ صفيحة ميكروية (450 نانومتر ، 630 نانومتر) ، طابعة ، جهاز تجفيف النيتروجين ، دوامة ، شاكر ، جهاز طرد مركزي (3000 جم وما فوق) ، ماصات قياس ، توازن (حساسية متبادلة تبلغ 0.01 جم) ، حاضنة (4 ℃ ، 25 ) ، حمام مائي ، مؤقت ؛
2) Micropipettors: أحادية القناة 20-200 ميكرولتر ، 100-1000 ميكرولتر ، وثماني قنوات 30 × 300 ميكرولتر ؛
3) الكواشف (AR): Na2HPO4▪12H2O ، NaH2PO4 · 2H2O ، خلات الإيثيل ، الهكسان ، الماء منزوع الأيونات.
5. عينة ما قبل المعالجة
تعليمات
يجب التعامل مع النقاط التالية قبل المعالجة المسبقة لأي نوع من العينات:
1) يمكن استخدام النصائح التي يمكن التخلص منها فقط للتجارب ويجب تغيير النصائح عند استخدامها لامتصاص الكواشف المختلفة ؛
2) قبل التجربة ، يجب أن تكون كل المعدات التجريبية نظيفة ويجب إعادة تنظيفها إذا لزم الأمر ، وذلك لتجنب التلوث الذي يتعارض مع نتائج التجربة.
تحضير المحلول قبل المعالجة المسبقة للعينة:
1) عازلة الغسيل: جزء واحد 20 × عازلة غسيل مركزة + 19 جزءًا من الماء منزوع الأيونات.
2) 0.2M عازلة الفوسفات: تزن 25.8 جم Na2HPO4▪12H2O ، 4.350 جم NaH2PO4 · 2H2O ، أضف 500 مل من الماء منزوع الأيونات ليذوب تمامًا.
5.1 تحضير العينة
عسل
1) تزن 2.0 ± 0.05 جم عينة عسل في أنبوب طرد مركزي بلاستيكي سعة 50 مل ؛
2) أضف 2 مل 0.2 م فوسفات مؤقت ، ثم أضف 8 مل إيثيل أسيتات ، رج بقوة لمدة 5 دقائق (أو استخدم دوامة لمدة 3 دقائق) لتلامس العينة مع المرحلة العضوية تمامًا ؛
3) أجهزة الطرد المركزي فوق 3000 جم عند درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق ؛
4) قم بنقل السائل الشفاف ذو الطبقة العلوية بسعة 4 مل إلى أنبوب الطرد المركزي سعة 5 مل (ملاحظة: لا تأخذ مرحلة المياه ذات الطبقة السفلية) ، ثم انفخها حتى تجف في حمام مائي 50-60 درجة مئوية ؛
5) أضف 1 مل من الهكسان و 0.5 مل من محلول إعادة التذويب وفقًا لذلك ، رج بقوة لمدة دقيقتين (أو استخدم الدوامة لمدة دقيقة واحدة) ؛
6) أجهزة الطرد المركزي فوق 3000 جم عند درجة حرارة الغرفة لمدة 5 دقائق ؛
7) تجاهل المرحلة العضوية الطبقة العليا ، خذ سائل الطبقة السفلية 50ul للاختبار.
طية تخفيف العينة: 0.5
6. إجراءات ELISA
6.1 تعليمات
1) أحضر جميع الكواشف وشرائط الآبار الدقيقة إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 ℃) قبل الاستخدام ؛
2) أعد جميع الكواشف إلى 2-8 ℃ مباشرة بعد الاستخدام ؛
3) تعتمد قابلية استنساخ تحليل ELISA ، إلى حد كبير ، على اتساق غسل اللوحة.العملية الصحيحة لغسيل الألواح هي النقطة الأساسية في إجراءات ELISA ؛
4) بالنسبة للحضانة في درجات حرارة ثابتة ، يجب أن تتجنب جميع العينات والكواشف التعرض للضوء ، ويجب أن يتم إغلاق كل صفيحة ميكروية بواسطة غشاء الغطاء.
6.2 إجراءات التشغيل
1. أحضر مجموعة الاختبار إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) لمدة 30 دقيقة على الأقل ، لاحظ أنه يجب رج كل كاشف لخلط بشكل متساوٍ قبل الاستخدام ، ضع شرائط الآبار الدقيقة المطلوبة في إطارات الألواح.أعد ختم الصفيحة غير المستخدمة ، واحفظها في 2-8 ℃ ، غير مجمدة.
2. الترقيم: ترقيم الآبار الدقيقة وفقًا للعينات والحل القياسي ؛يجب تنفيذ كل عينة وحل قياسي في نسختين ، وتسجيل مواقعهم.
3. أضف 50 ميكرولتر من العينة أو المحلول القياسي إلى آبار مكررة منفصلة ؛ثم أضف 50 ميكرولتر من محلول الجسم المضاد في كل بئر ، واخلط بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا.ختم صفيحة ميكروسكوبية مع غشاء الغطاء ، واحتضان في 4 ℃ لمدة 60 دقيقة في الظلام.
4. صب السائل خارج ميكروويل ، أضف 250 ميكرولتر / بئر من عازل الغسيل لغسل الصفيحة المصغرة لمدة 15-30 ثانية ، ثم اسكب عازل الغسيل من ميكروويل ، أضف عازل الغسيل ليغسل بهذه الطريقة لمدة 3-4 مرات ، ثم أخرجه ورفرف حتى يجف بورق ماص.
5. أضف إنزيم 100ul المتقارن (لا تضع الصفيحة المجهرية في درجة حرارة الغرفة لفترة طويلة بعد خطوة الغسيل لتجنب جفاف الصفيحة التي تؤدي إلى اختلاف النتيجة) ، اخلط بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا.ختم صفيحة ميكروسكوبية مع غشاء الغطاء ، واحتضان في 25 ℃ لمدة 20 دقيقة في الظلام.الغسل كخطوة 4.
6. التلوين: أضف خليط 100ul من محلول الركيزة A ومحلول الركيزة B في كل بئر (ملاحظة: قم بخلط محلول الركيزة A ومحلول الركيزة B عند 1: 1 ، استخدم الخليط في 10 دقائق ، ولا تستخدم المعدن للاحتواء أو التقليب ، تجنب الركيزة غير صالحة).امزج بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا ، وختم الصفيحة الدقيقة بغشاء الغطاء ثم احتضانها عند 25 درجة مئوية لمدة 15 دقيقة في الظلام للتلوين.
7. التحديد: أضف 50 ميكرولتر من محلول الإيقاف في كل بئر.امزج بلطف عن طريق هز اللوحة يدويًا.توقف بنجاح عند لون الركيزة من الأزرق إلى الأصفر.يوصى بقراءة قيمة OD عند الطول الموجي المزدوج 450/630 نانومتر في غضون 5 دقائق.
7. نتيجة الحكم
هناك طريقتان للحكم على النتائج: الطريقة الأولى هي الحكم الخام ، والثانية هي التحديد الكمي.لاحظ أن قيمة OD للعينة لها علاقة سلبية بتركيز Metronidazole.
7.1 التحديد النوعي
يمكن الحصول على نطاق التركيز (نانوغرام / مل) للميترونيدازول من مقارنة متوسط قيمة OD للعينة مع تلك الخاصة بالمحلول القياسي.بافتراض أن قيمة OD للعينة هي 0.3 وأن العينة هي 1.0 ، فإن قيمة OD للحلول القياسية هي: 2.243 لـ 0ppb ، 1.816 لـ 0.05ppb ، 1.415 لـ 0.15ppb ، 0.74 لـ 0.45ppb ، 0.313 لـ 1.35ppb ، 0.155 لـ 4.05ppb ، وبالتالي فإن نطاق تركيز العينة هو 1.35 إلى 4.05ppb ، ونطاق العينةⅡ هو 0.05 إلى 0.45ppb.
7.2 التحديد الكمي
يتم الحصول على القيم المتوسطة لقيم الامتصاصية لمتوسط قيمة OD (B) للعينة والحل القياسي مقسومًا على قيمة OD (B0) للحل القياسي الأول (0 قياسي) ثم يتم ضربها في 100٪ ، أي و
النسبة المئوية لقيمة الامتصاصية = | ب | × 100٪ |
ب 0 |
B - متوسط قيمة OD للعينة أو الحل القياسي
B0 - متوسط قيمة OD للحل القياسي 0 نانوغرام / مل
ارسم المنحنى القياسي بنسب الامتصاص للمحلول القياسي والقيم شبه اللوغاريتمية لمحلول Metronidazole القياسي (نانوغرام / مل) كمحور Y و X ، على التوالي.اقرأ التركيز المقابل للعينة من المنحنى القياسي بدمج نسبة امتصاصها في المنحنى القياسي.يتم ضرب القيمة الناتجة لاحقًا بواسطة طية التخفيف المقابلة ، للحصول أخيرًا على تركيز Metronidazole في العينة.
سيكون استخدام برنامج التحليل الاحترافي لهذه المجموعة أكثر ملاءمة للتحليل الدقيق والسريع لكمية كبيرة من العينات.(يرجى الاتصال بنا للحصول على هذا البرنامج).
8. الاحتياطات
1. ستؤدي درجة حرارة الغرفة التي تقل عن 25 درجة مئوية أو درجة حرارة الكواشف والعينات التي لا يتم إرجاعها إلى درجة حرارة الغرفة (20-25 درجة مئوية) إلى انخفاض قيمة OD القياسية.
2. سوف يكون جفاف الصفيحة الدقيقة في عملية الغسيل مصحوبًا بحالات تشمل المنحنيات المعيارية غير الخطية وقابلية التكاثر غير المرغوب فيها ؛لذا استمر في الخطوة التالية بعد الغسيل مباشرة.
3. تخلط بالتساوي ، وإلا سيكون هناك استنساخ غير مرغوب فيه.
4. محلول التوقف هو محلول حامض الكبريتيك 2 متر ، تجنب ملامسته للجلد.
5. لا تستخدم المجموعة التي تجاوزت تاريخ انتهاء صلاحيتها.سيؤدي استخدام الكواشف المخففة أو المغشوشة من المجموعات إلى تغييرات في الحساسية وقيم الكشف عن OD.لا تستبدل الكواشف من مجموعات مجموعات مختلفة لاستخدامها.
6. ضع الصفيحة غير المستخدمة في كيس الختم التلقائي لإعادة الختم.المحلول القياسي وسابق الألوان عديم اللون حساسان للضوء ، وبالتالي لا يمكن تعريضهما مباشرة للضوء.
7. تجاهل محلول التلوين بأي لون يشير إلى تدهور هذا المحلول.تشير قيمة الكشف للمحلول القياسي 1 (0 جزء في البليون) التي تقل عن 0.5 إلى انحلاله.
9. تاريخ التخزين وانتهاء الصلاحية
التخزين: يحفظ بدرجة 2-8 ℃ ، غير مجمدة.
تاريخ انتهاء الصلاحية: 12 شهرًا ؛تاريخ الإنتاج على العلبة.
Q1: متى سيتم شحنها؟
A1: سنقوم بشحن البضائع لك في أقرب وقت ممكن في غضون 7 أيام عمل بعد استلام الدفع.(في حالة وجود عوامل خارجية مثل الوباء ، قد يتأخر التسليم)
Q2: هل يدعم OEM / ODM؟
ج 2: يمكن دعمها ، لكن الكمية المحددة يجب أن تكون أكثر من 100000 قطعة ، وهو أمر مناسب للمنتجات المخصصة.
Q3: كيف يفعل المصنع الخاص بك من حيث مراقبة الجودة؟
A3: لقد حصلنا على شهادات ISO9001 و ISO13485 على الصعيد الوطني.تتوافق عملية الإنتاج لدينا مع الإجراءات القياسية لضمان الجودة المثلى للمنتج.
Q4: كيفية تقديم خدمة ما بعد البيع؟
A4: نحن نقدم خدمة ما بعد البيع التقنية المهنية عبر الإنترنت.يمكننا تزويدك بإرشادات فردية عبر الفيديو والهاتف وما إلى ذلك.
س 5: ما هي طريقة الدفع؟
A5: نتلقى الدفع عن طريق T / T.
س 6: كيفية الشحن؟
ج 6: اختر أفضل طريقة شحن لك من خلال الحصول على عروض أسعار من العديد من شركات النقل المتعاونة لدينا ، وكذلك الشحن وفقًا لمتطلباتك.